利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 105669603 A (43)申请公布日 2016.06.15

(21)申请号 201610120623.1(22)申请日 2016.03.03

(71)申请人重庆市碚圣医药科技股份有限公司

地址400718 重庆市两江新区水土高新产业

园云汉大道1号(72)发明人潘先文 潘敬坤 夏涛 张龙(74)专利代理机构北京海虹嘉诚知识产权代理

有限公司 11129

代理人谢殿武(51)Int.Cl.

C07D 305/14(2006.01)A61P 35/00(2006.01)

权利要求书1页 说明书4页

(54)发明名称

利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法(57)摘要

本发明公开了一种利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：将低纯度紫杉醇原料溶于有机溶剂后经制备液相色谱分离收集含有紫杉醇的洗脱液，然后经大孔树脂吸附、浓缩结晶处理制得超高纯度的紫杉醇产品；制备工艺、生产设备及操作步骤简单，所用原料易得，成本低，所得紫杉醇产品的纯度为99.99％以上，紫杉醇收率95％以上，可直接作为抗癌制剂的原料，应用于医药领用中。

C N 1 0 5 6 6 9 6 0 3 ACN 105669603 A

权　利　要　求　书

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1.一种利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：包括以下步骤：将低纯度紫杉醇原料溶于有机溶剂后经制备液相色谱分离收集含有紫杉醇的洗脱液，然后经大孔树脂吸附、浓缩结晶处理制得超高纯度的紫杉醇产品。

2.根据权利要求1所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：包括以下步骤：

a.按质量体积比为紫杉醇原料∶有机溶剂＝1∶5～100将紫杉醇原料溶于机溶剂后制得紫杉醇溶液经制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；

b.按体积比为大孔树脂∶Ⅰ洗脱液＝1∶10～30将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅱ进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。

3.根据权利要求1所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：所述紫杉醇原料中紫杉醇含量为10～80wt％。

4.根据权利要求2所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：步骤a中，紫杉醇原料溶于有机溶剂后经过微孔过滤处理再进行液相色谱分离。

5.根据权利要求4所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：步骤a中，有机溶剂为甲醇或乙醇。

6.根据权利要求5所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：步骤a中，质量体积比为紫杉醇原料∶有机溶剂＝1∶50。

7.根据权利要求2所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：步骤b中，大孔树脂与甲醇水溶液的体积比为1∶2～10，甲醇水溶液的浓度为50～95％。

8.根据权利要求7所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方 法，其特征在于：步骤b中，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5～60um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50～80vol％的甲醇或60～90vol％的乙醇。

9.根据权利要求7所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：步骤b中，真空浓缩温度为40～50℃，真空压力为0.02×105～0.2×105Pa。

10.根据权利要求7所述的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，其特征在于：大孔树脂与甲醇水溶液的体积比为1∶6，甲醇水溶液的浓度为80％。

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说　明　书

利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法

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技术领域

[0001]本发明涉及一种本发明涉及制备高纯植物药物的方法，特别涉及一种利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法。

背景技术

[0002]紫杉醇作为一种抗癌药品，临床应用对其纯度的要求非常高，并且其中的杂质可能会对人体产生副作用，这就对紫杉醇的纯化精制工艺提出了严格地要求，能较低成本的获得超高纯度的紫杉醇成为趋势，基于上述原因，改进或开发新工艺，寻求更为方便低廉的分离技术，越来越成为研究者们关注的热点。目前分离纯化紫杉醇的方法主要为吸附柱层析或分配柱层析法，然而该类方法需消耗大量的层析填料，而且在生产过程中填料需经常更换、清洗和活化，仅使生产成本很高，而且工作量大。现有制备高纯度紫杉醇的方法，如授权公告号为CN101177421B的“一种制备高纯度紫杉烷类化合物的方法”专利，公开的制备高纯度紫杉醇方法是：先用水性溶剂体系溶解原料，再采用大孔吸附树脂(如Diaion HP系列树脂、Amberlite XAD系列树脂)为固定相，以有机溶剂(如四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺等)的水溶液为洗脱液，采用常压柱层析方法进行层析，最后得到高纯度紫杉醇。该方法的主要缺点是：①所用原料中紫杉烷类化合物的纯度高达80.0～99.5wt％，原料纯度越高，原料成本所占百分比例越大；②制备过程中所用大孔吸附树脂主要采用进口的国外树脂，材料成本较贵；③紫杉醇纯度相对不够高。发明内容

[0003]有鉴于此，本发明的目的在于提供一种利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，制备工艺、生产设备及操作步骤简单，所用原料易得，成本低，所得紫杉醇产品的纯度为99.99％以上，可直接作为抗癌制剂的原料，应用于医药领用中。[0004]本发明的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：将低纯度紫杉醇原料溶于有机溶剂后经制备液相色谱分离收集含有紫杉醇的洗脱液，然后经大孔树脂吸附、浓缩结晶处理制得超高纯度的紫杉醇产品；[0005]进一步，包括以下步骤：

[0006]a.按质量体积比为紫杉醇原料∶有机溶剂＝1∶5～100将紫杉醇原料溶于机溶剂后制得紫杉醇溶液经制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；[0007]b.按体积比为大孔树脂∶洗脱液Ⅰ＝1∶10～30将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅱ进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇；[0008]进一步，所述紫杉醇原料中紫杉醇含量为10～80wt％；[0009]进一步，步骤a中，紫杉醇原料溶于有机溶剂后经过微孔过滤处理再进行液相色谱分离；

[0010]进一步，步骤a中，有机溶剂为甲醇或乙醇；

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进一步，步骤a中，质量体积比为紫杉醇原料∶有机溶剂＝1∶50；

[0012]进一步，步骤b中，大孔树脂与甲醇水溶液的体积比为1∶2～10，甲醇水溶液的浓度为50～95％；[0013]进一步，步骤b中，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5～60um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50～80vol％的甲醇或60～90vol％的乙醇；[0014]进一步，步骤b中，真空浓缩温度为40～50℃，真空压力为0.02×105～0.2×105Pa；[0015]进一步，大孔树脂与甲醇水溶液的体积比为1∶6，甲醇水溶液的浓度为80％。[0016]本发明的有益效果：本发明的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，制备工艺、生产设备及操作步骤简单，所用原料易得，成本低。所得紫杉醇产品的纯度为99.99％以上，紫杉醇收率95％以上，可直接作为抗癌制剂的原料，应用于医药领用中。具体实施方式

[0017]本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：将低纯度紫杉醇原料溶于有机溶剂后经制备液相色谱分离收集含有紫杉醇的洗脱液，然后经大孔树脂吸附、浓缩结晶处理制得超高纯度的紫杉醇产品。[0018]本实施例中，包括以下步骤：

[0019]a.按质量体积比为紫杉醇原料∶有机溶剂＝1∶5～100将紫杉醇原料溶于机溶剂后制得紫杉醇溶液经制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；[0020]b.按体积比为大孔树脂∶洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱Ⅰ＝1∶10～30将步骤中的洗脱液和吸附后经甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅱ进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇；上述处理方法结合紫杉醇原料与有机溶剂的用量比，大孔树脂与洗脱液Ⅰ的用量比，提高所制备的紫杉醇纯度以及紫杉醇收率，本实施例中，质量体积比为紫杉醇原料的质量(g)∶有机溶剂的体积(mL)之比，大孔树脂为AB-8、HPD300、D101中的一种。

[0021]本实施例中，所述紫杉醇原料中紫杉醇含量为10～80wt％；紫杉醇原料可选自提取自植物的紫杉醇类化合物、以合成法或半合成法制得的紫杉醇化合物或它们的组合。[0022]本实施例中，步骤a中，紫杉醇原料溶于有机溶剂后经过微孔过滤处理再进行液相色谱分离；微孔过滤起到分离目标产品的作用，提高分离效果，进而确保紫杉醇的产率，微孔过滤采用现有技术中的常规方法。[0023]本实施例中，步骤a中，有机溶剂为甲醇或乙醇；可回收利用，对环境污染小。[0024]本实施例中，步骤a中，质量体积比为紫杉醇原料∶有机溶剂＝1∶50；该用量比使所得紫杉醇产品的纯度更高，紫杉醇收率更高。[0025]本实施例中，步骤b中，大孔树脂与甲醇水溶液的体积比为1∶2～10，甲醇水溶液的浓度为50～95％；上述参数促进紫杉醇的分离效果，进而提高紫杉醇收率。[0026]本实施例中，步骤b中，制备液相色谱分离的制备柱所用填料为5～60um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50～80vol％的甲醇或60～90vol％的乙醇；经微孔过滤后采用大孔树脂进行初步分离，然后经液相色谱分离进行精确分离，上述用量参数确保分离效果，进而提高所得紫杉醇的纯度以及产率。[0027]本实施例中，步骤b中，真空浓缩温度为40～50℃，真空压力为0.02×105～0.2×

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105Pa。

本实施例中，大孔树脂与甲醇水溶液的体积比为1∶6，甲醇水溶液的浓度为80％。

[0029]下面通过具体实施例对本发明做进一步的阐述。[0030]实施例一

[0031]本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：[0032]a.按质量体积比为紫杉醇含量为10wt％的紫杉醇原料(g)∶有机溶剂(甲醇)(mL)＝1∶5将紫杉醇原料溶于机溶剂进行搅拌，然后经过微孔过滤后经制备柱填料为5um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为50vol％的甲醇的制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；[0033]b.按体积比为大孔树脂(mL)∶洗脱液Ⅰ(mL)＝1∶10将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经浓度为50％的甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，大孔树脂的体积(mL)∶甲醇水溶液的体积(mL)之比为1∶2，将洗脱液Ⅱ再温度为温度为40℃，压力为0.2×105下进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。[0034]实施例二

[0035]本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：[0036]a.按质量体积比为紫杉醇含量为80wt％的紫杉醇原料(g)∶有机溶剂(乙醇)(mL)＝1∶100将紫杉醇原料溶于机溶剂进行搅拌，然后经过微孔过滤后经制备柱填料为60um的

流动相为80vol％的甲醇的制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；十八烷基硅烷键合硅胶，

[0037]b.按体积比为大孔树脂(mL)∶洗脱液Ⅰ(mL)＝1∶30将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经浓度为95％的甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ大孔树脂的体积(mL)∶甲醇水溶液的体积(mL)之比为1∶10，将洗脱液Ⅱ再温度为温度为50℃，压力为0.02×105Pa[0038]下进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。[0039]实施例三

[0040]本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：[0041]a.按质量体积比为紫杉醇含量为50wt％的紫杉醇原料(g)∶有机溶剂(甲醇)(mL)＝1∶50将紫杉醇原料溶于机溶剂进行搅拌，然后经过微孔过滤后经制备柱填料为30um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为65vol％的甲醇的制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；[0042]b.按体积比为大孔树脂(mL)∶洗脱液Ⅰ(mL)＝1∶20将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经浓度为70％的甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，大孔树脂的体积(mL)∶甲醇水溶液的体积(mL)之比为1∶6，将洗脱液Ⅱ再温度为温度为45℃，压力为0.08×105。[0043]下进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。[0044]实施例四

[0045]本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：[0046]a.按质量体积比为紫杉醇含量为80wt％的紫杉醇原料(g)∶有机溶剂(乙醇)(mL)＝1∶5将紫杉醇原料溶于机溶剂进行搅拌，然后经过微孔过滤后经制备柱填料为5um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为60vol％的乙醇的制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；[0047]b.按体积比为大孔树脂(mL)∶洗脱液Ⅰ(mL)＝1∶10将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经浓度为95％的甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅱ再温度为温度为50℃，压力为0.02×105Pa下进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。[0048]实施例五

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[0028]

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本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：

[0050]a.按质量体积比为紫杉醇含量为10wt％的紫杉醇原料(g)∶有机溶剂(乙醇)(mL)＝1∶25将紫杉醇原料溶于机溶剂进行搅拌，然后经过微孔过滤后经制备柱填料为5～60um的十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为90vol％的乙醇的制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；[0051]b.按体积比为大孔树脂(mL)∶洗脱液Ⅰ(mL)＝1∶25将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经浓度为85％的甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅱ再温度为温度为48℃，压力为0.1×105Pa

[0052]下进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。[0053]实施例六

[0054]本实施例的利用低纯度紫杉醇原料制备超高纯度紫杉醇的方法，包括以下步骤：[0055]a.按质量体积比为紫杉醇含量为15wt％的紫杉醇原料(g)∶有机溶剂(乙醇)(mL)＝1∶35将紫杉醇原料溶于机溶剂进行搅拌，然后经过微孔过滤后经制备柱填料为50um的十

流动相为70vol％的乙醇的制备液相色谱分离收集洗脱液Ⅰ；八烷基硅烷键合硅胶，

[0056]b.按体积比为大孔树脂(mL)∶洗脱液Ⅰ(mL)＝1∶12将步骤中的洗脱液Ⅰ经大孔树脂柱饱和吸附后经浓度为90％的甲醇水溶液洗脱收集洗脱液Ⅱ，将洗脱液Ⅱ再温度为温度为41℃，压力为0.2×105下进行真空浓缩后结晶处理得到纯度为99.99％以上的紫杉醇。[0057]最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

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